正常原代细胞在培养过程中只能增殖有限数量的细胞群倍，之后就会出现生长停滞和衰老表型。细胞衰老是一种稳定的细胞周期停滞状态，衰老细胞的特点是不可逆的G1生长抑制，涉及抑制驱动细胞周期进程的基因以及细胞周期抑制因子（如p16INK4a、p53及其转录靶点p21CIP1）的上调。它们对有丝分裂诱导的增殖具有抵抗力，并且形态上细胞也会呈现异常增大和扁平状。细胞衰老可以通过检测衰老细胞的标志物来检测，如酸性衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-Gal）。
Cell Biolabs提供3种检测SA-β-Gal的试剂盒，为细胞衰老相关研究助力。
● 96-Well Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Activity, Fluorometric Format)
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货号 |
CBA-231、CBA-231-5 |
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规格 |
120 assays、5 x 120 assays |
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检测 |
荧光酶标仪 |
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组成 |
2 x Cell Lysis Buffer 2 x Reaction Buffer SA-β-Gal Substrate (20x) Stop Solution |
该试剂盒通过荧光底物测量SA-β-Gal的活性，提供了一种易于使用和高效的方法来确定细胞衰老。具体产品信息详见官网说明书。
● Quantitative Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal, Fluorometric)
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货号 |
CBA-232、CBA-232-5 |
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规格 |
10 assays (35 mm dishes)、5 x 10 assays (35 mm dishes) |
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检测 |
荧光显微镜/流式细胞术 |
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组成 |
Cell Pretreatment Solution (1000x) SA-β-Gal Substrate (200x) |
该定量检测试剂盒使用荧光底物来测量SA-β-Gal活性。这种化合物是β-半乳糖苷酶的一种膜渗透性非荧光底物，它在半乳糖残基水解后会发出绿色荧光，并保留在细胞内。与使用X-gal 的传统细胞化学测定相比，使用荧光底物大大提高了测定的灵敏度。此外，无毒的荧光底物还可以通过流式细胞仪研究活细胞，对SA-β-Gal活性进行定量。每个试剂盒可在35 mm培养皿中进行多达10个assay。具体产品信息详见官网说明书。
● Cellular Senescence Assay Kit (SA-β-Gal Staining)
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货号 |
CBA-230、CBA-230-5 |
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规格 |
50 assays、5 x 50 assays |
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检测 |
光学显微镜 |
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组成 |
100x Fixing Solution Staining Solution A Staining Solution B Staining Solution C Staining Solution D X-gal Solution |
该试剂盒利用SA-β-Gal催化X-gal的水解，在衰老细胞中 产生蓝色，将结果可视化。每个试剂盒都提供足量的试剂，可在35mm的培养皿中进行50个assay。具体产品信息详见官网说明书。
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